Microplaques reconditionnées pour le dosage des protéines par l'essai "Pierce BCA"
Cette étude a utilisé des microplaques neuves et reconditionnées pour un test Pierce™ BCA Protein Assay. Deux microplaques à 96 puits ont été contaminées par 0,5 ml de BSA (2 mg/ml), puis reconditionnées selon notre procédé. Les standards de BSA ont été préparés selon les schémas de dilution spécifiés dans le protocole du kit Pierce™ BCA Protein Assay (Thermo Fisher Scientific, numéros de catalogue 23225, 23227 et A65453), avec des concentrations allant de 25 µg/mL à 2000 µg/mL.
Chaque échantillon a été testé en double sur des microplaques neuves et reconditionnées conformément au protocole du kit. Pour l’essai, chaque standard de BSA ainsi que des contrôle negatifs (eau) ont été pipetés dans les puits désignés. Les plaques ont été incubées pendant 2 heures à 37°C pour garantir la détection de faibles concentrations de protéines. Des courbes standard ont été établies pour les microplaques neuves et reconditionnées, afin de comparer et d’analyser leur absorbance. La courbe de la nouvelle microplaque a également été utilisée pour déterminer les concentrations des contrôles négatifs (eau) sur les microplaques neuves et reconditionnées et s’assurer de leur similitude.
Cette expérience nous a permis d’évaluer la présence de protéines résiduelles.
Résultats
Les courbes standards obtenues à partir de microplaques neuves et reconditionnées sont équivalentes (les différences observées se situent dans la fourchette autorisée par le kit). En outre, les puits remplis d'eau dans les microplaques reconditionnées n'ont montré aucune différence par rapport aux puits de la nouvelle microplaque, ce qui indique qu'ils ne contenaient pas de protéines résiduelles.
De la même manière, le kit a été utilisé pour analyser la présence de protéines dans des tubes coniques de 1,5 mL. Aucune différence n'a été observée par rapport aux tubes neufs.
Conclusion
Notre procédé fonctionne de manière à permettre l'utilisation de microplaques reconditionnées et de tubes reconditionnés dans des expériences de quantification précise des protéines.
Écouvillons de protéines
Les indicateurs de nettoyage VERIFY® RESI-TEST™ détectent l’absence ou la présence de protéines et de résidus protéiques avec une sensibilité ≥ 1μg. Le test est colorimétrique : le bleu ou le vert foncé indique un échantillon contaminé par des protéines, et le brun ou le vert clair indique un échantillon non contaminé par des protéines. Ces tests sont utilisés contrôler l’efficacité de notre processus de nettoyage pour chaque lot de consommables reconditionnés.
Avant reconditionnement
Les consommables précédemment utilisés pour manipuler des composés tels que du sang ou des cellules sont positifs pour les protéines.
Après reconditionnement
À la fin de notre processus de nettoyage, les consommables sont testés pour détecter la présence de protéines avant d'être emballés. Un exemple est présentés ici pour des consommables précédemment utilisés avec du sang ou des cellules.